7分鐘前發(fā)布_非洲豬瘟試劑盒價格[風(fēng)途實惠優(yōu)惠]Preu del kit de la pesta porcina africana非洲豬瘟試劑盒價格:風(fēng)途物聯(lián)的優(yōu)惠力度大紮實做,還有好禮相送
非法非洲豬瘟疫苗的使用對我國非洲豬瘟的凈化工作造成巨大干擾,對我國養(yǎng)豬企業(yè)造成難以估量的生產(chǎn)損失節點。建議有關(guān)部門加快非洲豬瘟疫苗研發(fā)服務體系,對疫苗的使用進(jìn)行慎重評估進展情況,不可盲目推進(jìn)。

【產(chǎn)品名稱】
通用名稱:非洲豬瘟病毒熒光PCR核酸檢測試劑盒(PCR熒光探針法)
英文名稱:Diagnostic Kit for African Swine Fever Virus (PCR Fluorescence Probing)
[預(yù)期用途]
本試劑盒主要用于檢測疑似感染豬抗凝血及臨床病料中的非洲豬瘟病毒(ASFV, African Swine Fever
Virus)核酸特點,適用于非洲豬瘟病毒的檢測研究、輔助診斷和流行病學(xué)調(diào)查。
【試劑盒組分】
1、試劑盒組成及貯藏條件
名稱 | 50 T | 貯藏條件 |
1去創新、反應(yīng)液A | ImL | -20°C |
2結論、反應(yīng)液B | ImL |
3、陽性對照 | 250μL |
4體系、陰性對照 | 250μL |
5足夠的實力、PCR反應(yīng)液 | 850μL |
6、酶混合液 | 150μL |
2提高、需自備材料:生理鹽水全面闡釋、無菌槍頭、熒光PCR用反應(yīng)管結構、記號筆等適應性強。
【操作步驟】
一、樣品制備
1拓展基地、 血液樣品:采集抗凝血(抗凝劑為EDTA)或血清樣品綜合措施,編號備用。
2處理、 組織樣品:采集脾臟攜手共進、肝臟、淋巴結(jié)自然條件、扁桃體等病變組織樣品或軟蜱0.1g(黃豆粒大小)擴大公共數據,眼科剪剪碎于組織勻漿器或研缽中充分勻漿或研磨,再加1mL生理鹽水混勻體系流動性,4°C條件下8000 rpm/分鐘離心2分鐘設計標準,取上清液于滅菌離心管中,編號備用助力各行。
二經過、DNA提取
取反應(yīng)液A 20μL分別加入到新的1.5mL離心管,加入抗凝而或血清或組織上清液2μL混勻互動互補,室溫(20°C左右)靜置3分鐘培養,加入反應(yīng)液B 20μL,吹打混勻即可,若為抗凝全血趨勢,則需8000rpm/分鐘再離心2分鐘后做為待檢DNA溶液高效流通。
二、PCR擴(kuò)增
1、配液:取出PCR反應(yīng)液有力扭轉、酶混合液,在室溫*融化后深入,充分混勻形式,瞬離覆蓋範圍,可將酶混合液全部取岀直接加入到PCR反應(yīng)液中,充分混勻有效性,瞬離后按每份20μL分裝使用;或按照每份PCR反應(yīng)液17μL, 酶混合液3μL的比例取一定的試驗用量高質量發展,混合兩種反應(yīng)液,瞬離后按照每份20μL分裝到用熒光PCR 反應(yīng)管中,剩余試劑立即凍存;(操作過程要注意避光)
2形勢、加樣擴(kuò)增:分別向上述PCR反應(yīng)管中加入5μL樣本 DNA或陰性對照或陽性對照攻堅克難,混勻并瞬離, 放入熒光PCR儀上運(yùn)行以下程序:
步驟 | 條件 | 循環(huán)數(shù) |
UNG處理 | 50°C: 2分鐘 | 1 |
預(yù)變性 | 95°C: 3分鐘 | 1 |
預(yù)擴(kuò)増 | 95°C: 8 秒 55C: 8 秒 | 5 |
PCR擴(kuò)增 | 95°C: 8 秒 55°C: 8 秒 | 40 |
熒光通道選擇FAM,在40循環(huán)階段每個循壞的55°C時收集熒光信號。設(shè)置擴(kuò)增體系為25μL,同時要選擇 passive reference 和 quencher 為 none 的模式高效節能。
(注:若熒光PCR儀(如ABI7500)按說明書中的反應(yīng)程序設(shè)置后因持溫時間短無法運(yùn)行,可將預(yù)擴(kuò)增和PCR擴(kuò)增條件變更為95°C: 5秒 55°C:30秒相關。)
【結(jié)果判定】
1、 基線和閾值設(shè)定;基線調(diào)整取6-15個循環(huán)的熒光信號基地,閾值設(shè)定以閾值線剛好超過陰性對照檢測 熒光曲線的高點為原則影響力範圍。
2、 質(zhì)量控制:反應(yīng)結(jié)束后約定管轄,陰性對照的檢測結(jié)果應(yīng)無特定的擴(kuò)增曲線雙向互動,Ct值為>38或無;陽性對照 的Ct值應(yīng)≤30.0,且明顯的擴(kuò)增曲線;否則實驗視為無效。
3新創新即將到來、 樣品判定:待檢樣品熒光信號有指數(shù)型增加生產效率,且結(jié)果顯示Ct值<35.0,報告為陽性;未檢測到Ct 值或Ct值>38或無明顯擴(kuò)增曲線,則樣品判定為陰性設計能力。35≤Ct值≤8時更合理,復(fù)檢一次,重復(fù)結(jié)果為陽性者判定為陽性適應性,否則判定為陰性顯著。
【注意事項】
1、實驗前請仔細(xì)閱讀本試劑盒說明書不久前,嚴(yán)格按照操作步驟執(zhí)行緊迫性,在操作過程中對時間、試劑體積等精 確控制可以獲得好的結(jié)果機構。
2系統穩定性、 實驗室應(yīng)嚴(yán)格按照有關(guān)規(guī)定分區(qū)管理。各區(qū)間人員多種場景、器材、試劑及空氣流向應(yīng)有產(chǎn)格要求開展試點。
3集中展示、 有關(guān)耗材確保潔凈、無菌規劃,核酸提取完成后盡快進(jìn)入下一步試驗或冷凍保存建設。
4共同、預(yù)混后的試劑應(yīng)盡量在短期內(nèi)使用完畢,戶外使用應(yīng)在加冰袋的泡沫盒保存,每日試驗完畢應(yīng)及時 冷凍保存在此基礎上。
5、 對于熒光PCR管要避免徒手或使用過的手套接觸探索創新,檢測過程中使用不帶熒光物質(zhì)一次性乳膠手套開展。
6、 凍存試劑使用前應(yīng)于室溫下*融化前來體驗,充分混勻簡單化,瞬時離心使液體*沉于管底。
7發揮重要帶動作用、 樣品開拓創新、陰性對照封蓋后,在通風(fēng)環(huán)境添加陽性對照并及時封蓋明確了方向,避免組分間及氣溶膠等假陽性污染去完善。
8、 擴(kuò)增反應(yīng)完畢后的PCR管嚴(yán)禁開蓋,應(yīng)和試驗產(chǎn)生的其它廢棄物一起及時收集,遠(yuǎn)離PCR實驗室 進(jìn)行無害化處理必然趨勢。